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基因转染就用它,价格实惠又好用,还可以免费试用?

现代医学研究证明,疾病的发生是一个极其复杂的过程。在这个过程中,基因的抑制、过度表达或突变都可导致疾病的发生。特别在肿瘤的治疗领域,基因治疗已成为攻克和治愈肿瘤最具希望和挑战的方法。基因治疗是将具有正常功能的或者治疗作用的基因,通过特定的方式导入靶细胞,从而达到治疗疾病的目的。在基因治疗的实施过程中,除了寻找有效的治疗基因外,还必须选择合适的基因载体及基因导入方法,使一定量的目的基因能够进入靶细胞进行安全、有效、可控且稳定的表达。目前,应用于基因治疗研究的载体主要分成两大类:病毒性载体和非病毒载体。

病毒具有天然嗜性﹐能够自然感染细胞,将它们携带的基因转移到宿主细胞中,因此转导效率比较高,目前基因疗法中很多都使用了病毒载体,并已进入临床试验阶段。现使用的病毒主要有逆转录病毒﹑腺病毒、腺相关病毒等。非病毒基因载体在基因转染与表达的效率上没有病毒载体高,但他们具有独特的优势,如低毒性、低免疫原性﹑无传染性﹑合成制备方便、结构灵活可控,已经得到研究者的广泛应用,其中阳离子聚合物是最主要的且研究最广泛的非病毒基因载体之一。

阳离子聚合物–聚乙烯亚胺(polyethyleminine,PEI)

聚乙烯亚胺是目前研究最广泛的阳离子聚合物非病毒基因载体,它是由单体(-CH,CH,-NH-)构成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基团的水溶性聚合物。PEI单体中每3个原子含1个氮,并构成同的胺基。这些胺基的pKa值不同,使 PEI在较宽的pH范围均可以被质子化,这是PEI有较强的结合DNA和黏附细胞并作为基因转导载体的重要原因。

分子量是决定其转染效率重要因素,高分子量的PEI具有高效的基因转染效率,但因为其大量正电荷的存在以及非生物降解性,可以导致细胞膜去稳定化,显示出较大的细胞毒性,低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,但基因转染效率也随之降低。在HeLa、COS7、293T和CHO四种细胞上评价交联PEI作为基因载体体外转染pGL3的效率。发现二硫键含量和PEI分子量大小决定了转染效率。

不同分子量的PEI转染效率不同

枝状的 800 kD PEI 是首次报道的可用于多种细胞转染的试剂,枝状的 25 kD PEI(25B)用于 HEK293 细胞大规模瞬时转染,其转染效率较枝状2 kD、600 kD、800 kD 或线状 22 kD PEI(22L)的高。

有研究报道,比较了 3 种商品化的 PEI 转染试剂 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max、PEI pro,转染 HEK293 和 CHO 细胞,PEI pro 的转染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max,PEI pro 的毒性最强。经过优化,PEI-Max 的表达量优于 25 kD LPEI。

PEI 介导的瞬时转染中 DNA 和 PEI 比例一般为1:2 ~ 1:3(W/W),提高转染试剂比例会提高转染效率,但是随之细胞毒性也会增加。另外转染时的细胞密度、DNA-PEI聚合物的大小、培养基的组成等都会影响转染效果。

阳离子聚合物–脂质体

阳离子脂质体易穿透细胞膜,转染效率要明显高于其他转染试剂,因而也广泛用于瞬时转染,但因其化学合成不易,商业化常用的脂质体如 Lipofectamine 价格较高,远贵于其他化学转染试剂,因此只适合于小量瞬时转染

目前最常用的脂质体转染体系是将阳离子脂质体与 DNA 溶液混合,以形成 DNA 夹在脂质双分子层之间的结构。HEK293 细胞是非常适合进行瞬时转染的细胞,很容易接收外来 DNA,在合适的转染条件下,脂质体转染效率可达 80% 以上, 使用商品化罗氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的转染效率甚至可达90% 以上。但是传统的 CHO 细胞的转染效率相对较低,只有 40% ~ 60%。

Thermo Fisher 公司新开发的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬时转染系统的转染效率和表达量有了较大的提升,但是商品化的转染试剂盒培养基价格较贵,不太适用于产业化放大。

因此,目前PEI转染试剂,价格实惠深受广大科研伙伴的热爱。重点是超级便宜!!!便宜到什么程度呢?偷偷告诉你:据说一次可配1L的量!1L??天啊,怎么能用的完?如此便宜实惠的转染试剂该如何操作呢?

目前,小编给大家谋福利了,免费试用PEI转染试剂”活动!!

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SEROCHEM PRIME-P100-100MG 100mg
SEROCHEM Prime-AQ100-100ML 100ml
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