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用了这个转染试剂,慢病毒再也不用怕转不进去了!

在做慢病毒包装实验中,有科研小伙伴常遇到:用同样的病毒载体系统进行病毒包装实验,为什么有人做的很好,次次成功,有人却是时常做不出来,稳定性很差,不是滴度低就是没有转进去?花费了大量的时间和精力去找原因,实在是很心酸呢!

 

 

慢病毒包装有几个关键因素:细胞因素、载体系统、质粒抽提纯化情况

  • 细胞因素

低代数的细胞293T细胞非常重要!!当然也要保证细胞状态特别好,没有细微污染,铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的病毒哦!

  • 载体系统

在实验中最常见的慢病毒载体系统有三质粒系统、四质粒系统,当然使用三质粒系统的小伙伴居多,一定要选择成熟商业化的载体系统

  • 载体构建和质粒抽提纯化

我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失,或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯:建议目的基因载体和阴性对照GFP 载体是同一批,且建议每次包装都如此操作,要保证目的基因的表达载体构建纯化良好,质粒间比例得当,并且对质粒进行酶切验证

  • 细胞转染

如果以上都没有问题,那么最最最重要的环节就是慢病毒质粒转染293T细胞了,转染效果直接影响着出毒效率,那么一款好的转染试剂在此时就是至关重要了!在这里给大家推荐一款性价比超高的转染试剂,美国Polysciences家的PEI MAX 40K

PEI MAX 40K(也称为游离碱PEI 22K)是一种功能强大,值得信赖且经济高效的瞬时转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中,能在96孔板至100L生物反应器范围内提供始终如一高效的基因表达。越来越多的研究人员和公司使用PEI来替代其他类型转染试剂,以获得他们所需要的优势。相较于其他类型转染试剂,使用自行制备的PEI转染试剂可以使总转染成本降低高达40%左右。

 

Thomas M,et al(2005)研究数据表明,去乙酰化的PEI40000(Polyethylenimine MAX40000)体外质粒DNA转染效率提高21倍,小鼠体内靶向效率达到10000倍,随之肺部特异疗效显示增强1500倍。

这么好的效果,你一定知道美国Polysciences公司!

美国Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精细化学试剂、实验室产品,单/多聚体等产品的研发供应,所提供的产品服务于组织学(显微技术)、生物技术、电子技术、护理及制药工程等多个领域。起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。与政府机构合作,开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家癌症中心合作,开发天然产物分离和纯化产品,并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠,用于DNA、蛋白质和肽的研究。Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用,并不断开发和增强其性能。公司秉承为应用而研发,目前已拥有超过3000种产品。

质量保证

  • 遵循ISO 13485质量管理认证
  • 获得美国FDA有效注册
  • 遵守良好生产规范(cGMP)
  • 获得管理系统CSMS认证
  • 特种化学行业公认的代言人

功能强大、经济实惠、安全可靠

这么好的转染试剂,难道你不心动吗?

华雅思创生物经营品牌

经过几年的不懈努力,华雅思创生物提供的产品覆盖免疫细胞治疗、干细胞治疗、干细胞基础研究、动物模型疾病研究、基因检测(NGS)、试管婴儿、产品质控等诸多热点科学研究领域。如今,华雅思创已经成为Lifeline、Takara、Origen、Corning、BD、Peprotech、illumina、BECKMAN、LONZA、CellGenix、Stemcell、Labobanker2、Gibco、StemRD、PreAnalytiX、Irvine Scientific、eBioscience、CSTI等五十余家国际知名企业代理商,为中国广大科研伙伴提供全面解决方案!

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