In Situ Cell Death Detection Kit, AP
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英文名称:In Situ Cell Death Detection Kit, AP
中文名称:原位细胞凋亡检测试剂盒, AP
原位细胞凋亡检测试剂盒, AP 产品介绍:
原位细胞凋亡检测试剂盒广泛应用于检测细胞凋亡,包括利用琼脂糖凝胶电泳的基因组DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脱氧尿嘧啶的DNA断裂分析。细胞凋亡早期标志是核DNA连接区域的选择性降解。DNA裂解将促使双链或单链DNA断裂。两种类型断裂都可用游离3’-OH末端标记的修饰核苷酸(比如,生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 荧光素-dUTP)在酶促反应中检测到。末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)催化脱氧核糖核苷酸独立聚合为以3’-端结尾的单链和双链DNA。这种方法被称为TUNEL (TdT介导的dUTP-X 缺口末端标记)。游离3’-OH也可利用DNA聚合酶标记(模板依赖型的缺口平移)。但是,TUNEL方法更灵敏快速。
检测原理:原位细胞凋亡检测试剂盒基于对细胞凋亡早期发生的单链和双链DNA断裂的检测。凋亡细胞被固定和渗透。随后,这些细胞和TUNEL反应混合物(包含TdT和荧光素-dUTP)一起孵育。孵育期间,TdT催化荧光素-dUTP标记的游离3’-OH添加到单链和双链DNA中。清洗后,标记物包含在DNA断裂位点处,并被抗荧光素抗体结合物识别标记(报告酶碱性磷酸酶)。清洗去除未结合的酶配体,AP保留在免疫复合物中,可通过底物反应观察到。
样本材料:细胞离心涂片器和细胞涂片制备,载玻片上生长的贴壁细胞,冷冻和蜡包被的组织切片
产品特点:
灵敏:最大凋亡细胞标记强度(细胞染色),比缺口平移要高
快速:荧光素-dUTP标记使其在TUNEL反应结束后直接可进行样本分析(2-3 h)
方便:使用荧光素d-UTP直接标记法可在检测时确认TUNEL反应效率
准确:可在分子水平(DNA链断裂)鉴定极早期凋亡细胞
灵活:不包含底物;可选择不同染色方法
产品成份:
• 酶溶液(TdT)
• 标记溶液(荧光素-dUTP)
• 媒介物AP(抗-荧光素抗体-AP),即开可用
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