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分析RNA降解的常见原因,如何防止RNA降解

RNA降解是一个常见的问题,特别是在进行RNA提取和下游分析时。以下是导致RNA降解的一些常见原因及其相应的解决方案:

  1. 新鲜细胞: 裂解液不足会导致裂解不充分,从而使部分RNA未被释放出来。为了确保RNA完全释放出来,应在裂解过程中加入足够的裂解液。
  2. 新鲜组织: 若组织中含有内源性核酸酶,则很难避免RNA酶的降解。建议采用的方法是在液氮条件下将组织研磨,并且,在匀浆时采用更多的裂解液。
  3. 冷冻样品: 如果样品未经液氮速冷直接转移到-70℃冰箱存放,会使RNA缓慢降解。为了避免这种情况,应在样品取材后迅速置于液氮中冷冻存放,然后转移到-70℃冰箱存放。

  4. 外源RNA酶的污染: 实验试剂、器械等实验用品应采用DEPC水灭菌处理,以消除外源RNA酶的污染。
  5. 内源RNA酶的污染: 抑制剂失效或者用量不够,以及实验样品过多或匀浆温度过高都可能导致内源RNA酶的污染。为了减少内源RNA酶的影响,可适当增加抑制剂的浓度,确保样品处理时处于适宜的温度。
  6. 长时间暴露于高温或光照环境下: RNA容易受到紫外线和高温的影响而发生降解,因此在实验过程中应避免样品暴露于高温或光照环境下。
  7. 提取过程中的反复冷冻解冻: 这种情况会破坏RNA结构,使其更容易受到酶的作用而降解。因此,在RNA提取过程中应尽量减少冷冻解冻次数,最好一次性完成整个提取过程。

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产品货号:762165
产品规格:2.5mL,100支/盒

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