在神经科学研究中,如何准确识别和标记成熟神经元,是理解神经发育、环路功能及相关疾病机制的核心环节。NeuN(Neuronal Nuclei,神经元核蛋白)作为一种DNA结合的神经元特异性蛋白,广泛表达于中枢和周围神经系统的大多数成熟神经元中,是区分神经元与非神经元细胞最具代表性的标志物。Merck-millipore 的 MAB377 抗NeuN抗体(克隆号 A60),正是这一领域应用最广泛、验证最充分的经典工具。
一、产品概述
MAB377 是 Chemicon® 品牌旗下的一款小鼠单克隆抗NeuN抗体,克隆号为 A60,以纯化免疫球蛋白形式提供。该抗体可特异性识别DNA结合的神经元特异性蛋白NeuN,存在于所有被测脊椎动物的大多数中枢神经系统和周围神经系统神经元细胞中。MAB377 已发表并经验证可用于流式细胞术(FC)、免疫细胞化学(IC)、免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IH)、石蜡包埋组织免疫组化(IH(P))、免疫沉淀(IP)以及Western Blot(WB)等多种实验技术,是神经科学领域引用量极高的抗体之一,文献引用超过2500篇。
该产品仅供研究使用,不适用于人体或诊断用途。
二、核心参数
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 产品货号 | MAB377 |
| 产品名称 | Anti-NeuN Antibody, clone A60 |
| 品牌 | Merck-millipore(Chemicon®) |
| 克隆号 | A60 |
| 宿主 | 小鼠 |
| 抗体类型 | 单克隆抗体 |
| 免疫球蛋白亚型 | IgG1 |
| 抗体形式 | 纯化免疫球蛋白(Protein A纯化) |
| 免疫原 | 纯化的小鼠脑细胞核 |
| 分子量 | 46/48 kDa |
| 种属反应性 | 禽、鸡、雪貂、人、小鼠、猪、大鼠、蝾螈 |
| 应用 | FC、IC、IF、IH、IH(P)、IP、WB |
| 浓度 | 1 mg/mL |
| 储存温度 | 2-8°C |
| 运输条件 | 湿冰运输 |
| RRID | AB_2298772 |
三、靶点概述:NeuN的生物学功能
NeuN 是一种DNA结合的神经元特异性核蛋白,其分布明显局限于胎儿和成人大脑中的神经元细胞核、核周体以及部分近端神经元突起。免疫组化染色主要位于神经元细胞核,细胞质染色较浅。强核染色提示NeuN可能具有核调节蛋白的功能。
值得注意的是,有少数神经元类型在所有年龄段均不被NeuN识别,包括:INL视网膜细胞、Cajal-Retzius细胞、浦肯野细胞、下橄榄核和齿状核神经元以及交感神经节细胞等。在发育过程中,NeuN的免疫反应性首先在神经元发生有丝分裂后不久即可观察到,增殖区未观察到染色。免疫反应性在小鼠神经管中约E9.5时出现,至E12.5时广泛分布于发育中的神经系统。
四、技术验证与数据
Western Blot 验证
该抗体在Western Blot中可识别46-48 kDa范围内的2-3个条带,可能在约66 kDa处识别出另一条带。已有敲除验证数据支持其特异性。
免疫组化验证
在免疫组化应用中,推荐稀释度为1:100-1:1,000。该抗体在聚酯蜡包埋组织上效果最佳,在石蜡包埋组织上以较低工作稀释度同样适用。该抗体与甲醛类固定剂兼容性良好,柠檬酸和微波预处理已成功应用。有独立验证数据显示,该抗体在IHC中功能良好,已在人类和动物组织中验证有效。
免疫细胞化学验证
在免疫细胞化学中,推荐使用1:10-1:100稀释度。培养的神经元应使用0.1% Triton X-100进行透化处理。
文献引用
该抗体在开放获取文献中已被提及超过1270次,总引用量超过2500篇。近期应用包括氢氣促进新生儿缺氧缺血性脑损伤神经保护研究、Raf-ERK信号动态调控神经元活动研究以及小胶质细胞VRK2调控丘脑星形胶质细胞GABA合成研究等。
五、适用研究领域
MAB377 抗NeuN抗体适用于以下研究方向:
神经元鉴定与标记:成熟神经元的特异性识别,适用于中枢和周围神经系统各脑区
神经发育研究:神经元分化、成熟及迁移过程的研究
神经环路与突触研究:脑区神经元定位及环路示踪
神经退行性疾病:阿尔茨海默病、帕金森病等疾病模型中神经元丢失的评估
脑损伤与修复:创伤性脑损伤、脑缺血后神经元存活分析
脊髓损伤研究:脊髓神经元标记及损伤后修复评估
神经移植研究:移植物中神经元细胞的鉴定与追踪
原代神经元培养:体外培养神经元的鉴定与纯度评估
六、使用说明
储存与处理:
收到产品后于 2-8°C 储存
自收之日起,2-8°C条件下可稳定保存 6个月
产品为纯化小鼠免疫球蛋白IgG1液体,缓冲液含0.02 M磷酸盐缓冲液、0.25 M NaCl,pH 7.6,含0.1%叠氮化钠
推荐工作稀释度:
| 应用 | 推荐稀释度 |
|---|---|
| Western Blot | 前一批次识别46-48 kDa范围内2-3个条带 |
| 免疫细胞化学(IC) | 1:10 – 1:100 |
| 免疫组织化学(IH) | 1:100 – 1:1,000 |
| 免疫组化(石蜡切片) | 前一批次已验证,最佳稀释度由用户确定 |
| 免疫荧光(IF) | 1:500(参考文献数据) |
最佳工作稀释度需由最终用户根据自身实验体系进行优化确定。
阳性对照:脑组织。
阴性对照:非神经元组织,如成纤维细胞。
注意事项:
培养的神经元应使用0.1% Triton X-100进行透化处理
一抗稀释应使用仅含缓冲液和一抗的简单溶液,不含过多蛋白封闭剂或洗涤剂
双标记研究中如使用小鼠单克隆抗体,建议顺序孵育,MAB377最后加入
七、产品优势
✅ 经典克隆,验证充分
克隆号 A60 是NeuN抗体领域唯一的经典克隆,自报道以来已在超过2500篇文献中得到验证,具有卓越的特异性和重复性。该抗体已在流式细胞术、免疫细胞化学、免疫荧光、免疫组化、免疫沉淀和Western Blot等多种平台验证。
✅ 种属覆盖广泛
可识别禽、鸡、雪貂、人、小鼠、猪、大鼠、蝾螈等多种属的NeuN蛋白,为跨物种比较研究提供了便利。
✅ 多平台兼容
同时适用于流式细胞术、免疫细胞化学、免疫荧光、免疫组织化学(包括石蜡切片和冰冻切片)、免疫沉淀和Western Blot,可满足不同实验设计的需求。
✅ 独立验证支持
该抗体已通过纽约大学Langone医学中心的独立验证,确认在人类和动物组织中IHC功能良好。
✅ 文献基础深厚
超过2500篇同行评审文献引用,涵盖神经科学研究的各个方向,为实验数据的可靠性提供了坚实保障。
MAB377 抗NeuN抗体以其经典克隆 A60 的卓越特异性、广泛的种属覆盖和丰富的文献验证,成为神经科学研究中成熟神经元标记的可靠选择。