干细胞、原代细胞、流式检测、单细胞测序相关实验中，细胞解离是非常关键的一步。传统胰酶消化力度强，很容易损伤细胞表面抗原、降低活率，敏感细胞经常传代后状态差、实验数据波动大。Merck‑Sigma（默克）A6964‑100ML Accutase® 溶液是科研圈广泛使用的无动物源细胞解离试剂，可直接替代胰酶‑EDTA，兼顾解离效率与细胞活性。

本文结合实测体验，梳理 Accutase 溶液的实验痛点、核心性能、适用场景与正规采购渠道。

重要提示：华雅思创现货供应 Merck‑Sigma 全系试剂耗材，A6964‑100ML Accutase 溶液可咨询库存，干冰冷链发货，配套原厂 COA 文件，保障细胞实验稳定开展。

一、传统胰酶消化 4 大常见实验痛点

很多细胞实验失败，并不是培养条件问题，而是消化试剂选择不当：

1. 消化过于剧烈，损伤细胞表面抗原，干扰流式检测普通胰酶会无差别切割细胞膜表面蛋白、CD 标志物。消化之后，流式抗体染色信号偏弱、结果失真，无法真实反映细胞表型，给后续数据分析带来很大干扰。

2. 干细胞、原代细胞活率下降，复苏效率低iPSC、间充质干细胞、原代内皮、原代成纤维细胞对胰酶耐受差；消化时间稍微把控不好，就会出现大量细胞凋亡，传代后贴壁差、增殖缓慢，冻存之后复苏率大打折扣。

3. 需要血清终止消化，操作繁琐，引入外源干扰胰酶消化结束必须添加含血清培养基中和，多一步操作，增加污染风险；无血清体系实验，还需要额外准备胰酶抑制剂，实验流程复杂。

4. 动物源组分，批次波动大，不适合高级别科研项目普通胰酶来源于动物胰腺，存在外源因子风险，批次之间酶活差异明显，不利于课题结题、论文发表以及临床前相关研究。

二、Merck‑Sigma A6964‑100ML Accutase 溶液核心优势

Accutase® 为即用型复合酶溶液，含有蛋白水解酶 + 胶原溶解酶复合体系，不含哺乳动物、细菌来源组分，在无动物源培养体系中同样适用，专门解决敏感细胞解离难题。

1. 温和解离，最大程度保留细胞表面表位，适配流式、单细胞测序

相比胰酶，Accutase 对膜蛋白、表面抗原切割程度低，解离完成后细胞表面标志物完整性高。消化得到的单细胞悬液，直接用于流式细胞术、单细胞 RNA 测序，数据真实可靠，减少实验系统误差。

2. 无需血清中和，简化实验操作流程

完成细胞解离之后，直接加入培养基稀释即可钝化酶活性，不需要血清终止，也不需要多次洗涤。简化传代操作，缩短处理时间，降低污染风险，适配无血清培养体系。

3. 干细胞、原代细胞友好，提升细胞活率与冻存复苏效果

对 iPSC、hESC、神经干细胞、间充质干细胞、各类原代细胞表现优异。消化后细胞活率高，形态完整，传代贴壁稳定，冻存之后复苏存活率显著优于普通胰酶‑EDTA 方案，也可以用于神经球等细胞团块打散制备单细胞悬液。

4. 即用型无菌溶液，质控严格，批次稳定性强

A6964‑100ML 经过滤除菌，内毒素≤1 EU/mL，细胞培养级别质控。每批次附带 COA 质检报告，酶活稳定在 400‑600 units/mL，不同批次之间解离效果波动小，实验重复性更好，可支撑课题、SCI 论文实验数据要求。

5. 储存灵活，减少试剂浪费

未开封‑20℃长期保存；解冻后 4℃条件下可以稳定存放 2 个月，不用反复冻融分装，减少酶活损失，适合中小型课题组日常使用。

三、A6964‑100ML 产品参数

货号：A6964‑100ML

品牌厂商：Merck‑Sigma（原 Sigma‑Aldrich）

产品名称：Accutase® Solution 细胞解离溶液

规格：100 mL

酶活：400‑600 units/mL

基质体系：无钙镁 DPBS，含 EDTA、酚红

pH 范围：6.8‑7.8

级别：BioReagent 细胞培养级，过滤无菌

内毒素：≤1 EU/mL

储存条件：未开封‑20℃；解冻后 4℃可保存 2 个月

运输条件：干冰运输

组分特点：无动物源、无细菌源成分

四、主要适用实验场景

干细胞研究：iPSC、胚胎干细胞、间充质干细胞传代、单细胞制备、冻存前处理

原代细胞：原代成纤维细胞、内皮细胞、神经元细胞解离传代

流式细胞实验：免疫表型检测、表面标志物分析

单细胞测序：细胞团块、神经球打散，制备高质量单细胞悬液

肿瘤细胞系、昆虫细胞常规传代培养

无血清培养体系、生物反应器小规模放大实验

类器官解离、病毒学相关细胞功能测定

五、正规采购保障｜华雅思创现货供应 Merck‑Sigma 试剂

细胞级酶类试剂对储存、运输条件严苛，运输温度失控会直接造成酶活失效。华雅思创现货供应 Merck‑Sigma A6964‑100ML Accutase 溶液及全系耗材试剂：

✅ 现货可询，支持小批量与实验室整单采购
✅ 干冰冷链运输，保障全程低温，避免酶活性损耗
✅ 原厂正品，每批可提供 COA 质检报告，满足结题、论文资料要求
✅ 配套技术参考：提供消化参考时间、储存、操作注意事项答疑

六、科研高频 FAQ

Q1：Accutase 和胰酶的关键区别是什么？胰酶动物来源，消化猛烈，必须血清中和，容易破坏细胞表面抗原；Accutase 为无动物源复合酶，作用温和，培养基稀释即可终止，保护膜蛋白，更适合流式、单细胞测序、干细胞实验。

Q2：Accutase 消化需要孵育多久？37℃孵育时间总体接近胰酶，多数贴壁细胞 3‑8 min；干细胞、细胞团块可延长至 8‑10 min，显微镜观察细胞变圆即可，它短时间过度消化对细胞损伤远小于胰酶。

Q3：解冻之后如何保存？可以反复冻融吗？不建议反复冻融。整瓶解冻后放置 4℃，2 个月内用完；若短期不用，建议分小份‑20℃保存。

可以处理中等大小细胞团；如果团块致密难打散，建议选用更高酶活的 Accumax 产品搭配使用。

Q5：必须干冰收货吗？收到部分融化还能不能用？到货只要内部还有冰块、整体处于低温状态，不影响使用；完全回温到室温则不建议继续长期保存使用。

总结

Merck‑Sigma A6964‑100ML Accutase® 溶液作为一款无动物源温和细胞解离试剂，凭借保护细胞表面抗原、无需血清中和、干细胞友好、批次稳定的特点，已经成为干细胞、原代细胞、流式、单细胞测序实验的优选消化试剂。