产品编号：HY-15167

Takara 635748 Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Maxi) 细胞外囊泡分离试剂盒 8 Maxipreps

Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Maxi)

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8 Maxipreps

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注册品牌： Takara
生产厂家： Takara
订购货号： 635748
规格型号： 8 Maxipreps
产品编号： HY-15167
产品种类： MSC间充质干细胞产品

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■ 产品概述

本制品是基于Capturem新型膜技术的一次性使用离心柱，可在30 min内实现血浆等多种生物体液样品中细胞外囊泡（EVs）的简单快速提取。其基本原理是根据EVs的生化性质，选择与其特异性结合的凝集素（非抗体）固定于Capturem™膜上，进而对EVs进行提取，产物纯度高、污染少。

■ 产品特点

· 适用范围广— 可应用于全血、血浆、血清、唾液、尿液、脑脊液、母乳、细胞培养上清液等多种生物体液样品中的EVs提取
· 快速、重复性好– 30 min内即可从最高850 μl（Mini）或24 ml（Maxi）生物体液样品中快速提取EVs，不同操作者也可获得具有重复性的EVs收量
· 收量高— EVs最高收量可达10¹⁰（Mini）或10¹¹（Maxi），可获得足够的exosomal RNA应用于下游的RT-qPCR、 NGS等研究
· 纯度高— 提取的EVs经Western Blot检测表达exosome蛋白质，而不表达nonexosomal污染蛋白质，如calnexin和 albumin
· 完整性好– 基于凝集素的提取原理，EVs不易被破坏，TEM下观察呈经典形态
· 简单易用— 试剂盒组分配备齐全，包含一次性的预清洁柱，一次性的离心柱，以及平衡、洗涤和洗脱缓冲液，且经过优化，操作简便

■ 操作流程

注：1. *过滤步骤使用100-kDa MWCO的过滤装置，过滤时间取决于样品的类型和体积。
2. 本制品最大载样量约为10¹⁰ EVs/column（Mini）或10¹¹ EVs/column（Maxi），多次上样收量也不会超过最大值。

■ 实验例

实验例 1

与超速离心法相比，本制品分离得到的EVs浓度和纯度更高。分别使用本制品和超速离心法从500 μl血浆样品中分离EVs，进行三次重复性实验，使用Nanoparticle tracking analysis (NTA) 检测。每种方法的粒径分布计算以平均值（黑线）和标准误差（红线）显示。结果显示，本制品提取的EVs平均粒径大小为81 nm（D90=110 nm），超速离心法提取的EVs平均粒径大小为135 nm（D90=203 nm）。上图可见，使用本制品提取的EVs具有更窄的粒径分布范围，且稳定性更好。

实验例 2

使用本制品成功地从不同生物体液样品中提取EVs。上图NTA结果显示，本制品可以应用于多种生物体液样品的EVs提取，如母乳、唾液、脑脊液、血清、尿液、条件培养基。每种方法的粒径分布计算以平均值（黑线）和标准误差（红线）显示。

实验例 3

对使用本制品与超速离心法提取的EVs中的目的蛋白质进行Western blot分析。结果显示，与超速离心法相比，本制品提取的EVs包含更多的exosome特异性标记物CD63、CD9和Alix，而non-exosome蛋白质（calnexin和albumin）含量较少。因此，本制品提取的EVs纯度更高、污染蛋白质更少。

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