DIG High Prime DNA Labling and Detection Starter Ⅱ
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产品英文名称:DIG High Prime DNA Labling and Detection Starter Ⅱ
产品中文名称:地高辛标记DNA和检测试剂盒Ⅱ
地高辛标记DNA和检测试剂盒Ⅱ 产品介绍:
高效地高辛(DIG)标记探针可应用于RNA杂交,DNA杂交,点杂交分析等,同时也可用于克隆和噬菌斑杂交。试剂盒使用DIG-11-dUTP(碱不稳定性)随机引物标记DNA模板并对DIG标记杂交物进行化学发光检测。试剂盒备有即开即用的CSPD发光底物,现有的封闭液和DIG易杂交颗粒。高效DIG混合物包含稳定Klenow enzyme(克列诺酶),核苷酸,引物和反应缓冲液。与第一代相比具有更高的准确性、更好的灵敏度、操作时间更短等特点,是非放射性高效标记与检测技术的首选,被广泛地应用于各种膜杂交及原位杂交技术中。
检测原理: 高效DNA地高辛标记和检测试剂盒II是用地高辛(Digoxigenin ,简称DIG;又称异羟基洋地黄毒甙元,是一种类固醇半抗原分子)标记的DNA探针,应用于分子杂交和随后的化学发光检测。罗氏公司的该试剂盒检测主要分三阶段进行:1)DNA标记:根据随机引物标记技术,生成DIG地高辛标记的DNA探针。2)杂交:按照标准杂交方法进行,将地高辛标记的DNA探针用于核酸点杂交,可选择带正电的尼龙膜或纯硝酸纤维素膜作为杂交膜。3)免疫学检测:首先将标记有AP的地高辛抗体与杂交探针免疫结合;然后在477nm波长下,通过检测碱性磷酸酶与CSPD底物产生的化学发光反应的数值,从而达到免疫检测的目的。
高效率DIG引物标记优点:进一步提高标记效率,质粒、柯斯质粒和噬菌体DNA,线状或超螺旋DNA均可作为模板,都具有同样的标记效率。
产品组成成份:
• DIG-High Prime, 5x conc., 50 µl
• DIG-labeled Control DNA, 20 µl, (5 µg/ml) pBR328 (linearized with Bam HI)
• DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml
• Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 50 µl
• CSPD, ready-to-use, 50 ml
• Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml
• DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml
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