Fura 2-AM
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产品英文名称:Fura 2-AM
产品中文名称:Fura 2-AM 钙离子荧光探针
Fura 2-AM 钙离子荧光探针产品简介
分 子 式: C44H47N3O24
分 子 量: 1001.85
外 观: 黄色或橙黄色粉末
别 名: Fura 2-AM
纯 度: 98%以上(HPLC)
储存条件: -20℃
运输条件: 室温
Fura 2-AM 钙离子荧光探针产品特性
Fura 2是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一,Fura 2-AM(钙离子荧光探针)需用无水DMSO(anhydrous DMSO)溶解。
Fura 2对Quin 2的荧光特性做了改进。1 μM Fura 2结合后的信号强度相当于30 μM的Quin 2结合后的信号强度。这样就保证在实验中可以使用比Quin 2的浓度低得多的Fura 2指示剂。Fura 2是一种使用最广泛的比率测量的钙荧光指示剂。目前适用于Fura 2实验的设备有很多,它特别适合于用数字成像显微镜来检测。它比Indo 1更不易受到光褪色作用的影响。细胞形状的改变有时候会影响340 nm和380 nm的荧光比率,比如,平滑肌收缩会同时引起这些波长的荧光信号强度的减小。另外,对于血管来说,340 nm的信号强度的增加会因为血管收缩而趋向于变小,而380 nm信号强度的减小会因为血管收缩而变大。Fura 2-AM是Fura 2的一种乙酰甲酯衍生物,通过培养,能够轻易地负载到细胞中。
Fura 2可以和钙离子(Ca2+)结合,结合钙离子后在330-350 nm激发光下可以产生较强的荧光,而在380 nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340 nm和380 nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度,可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,荧光探针的渗漏,细胞厚度差异等误差因素。
Fura 2-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura 2-AM的荧光比较弱,最大激发波长为369 nm,最大发射波长为478 nm,并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura 2-AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura 2,从而被滞留在细胞内。Fura 2和钙离子结合后,最大激发波长为335 nm(最大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同),最大发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm,发射波长为510 nm。如果做双波长检测,则推荐使用的激发波长为340 nm和380 nm。
Fura 2-AM 钙离子荧光探针使用注意事项
1.试剂容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量,开封前,请轻弹管壁几次,以保证粉末落入管底。
2.第一次使用时, 建议母液即配即用。试剂溶解后尽可能在短时间内使用,以保证实验效果。
3.溶解液DMSO需要保证新鲜无水,否则将会导致AM体水解,使荧光染料无法进入细胞,影响实验效果。
4.母液遇水极易分解,如果不能一次用完,建议分装保存,例如分装成5 μl/管,用封口膜封口,并用铝箔纸包裹,放在一个密闭性能好的塑料袋中,并放入一包干燥剂,在≤-20℃密封避光保存。
5.建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。
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