PEI Prime™️ AQ 1 mg/mL Liquid Transfection Reagent
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产品名称:SEROCHEM Prime-AQ100-5ML PEI Prime™ 转染试剂
产品货号:Prime-AQ100-5ML
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产品名称:PEI Prime™️ AQ 1 mg/mL Liquid Transfection Reagent
产品货号:Prime-AQ100-5ML
产品说明:
5ML
产品介绍:
PEI PrimeTM是一种高性能的转染试剂,为大量,低成本和可扩展的瞬时基因表达设计。PEI是最常用的HEK293和CHO悬浮培养的瞬时转染试剂。PEI PrimeTM是在哺乳动物表达系统中生产重组蛋白、抗体和病毒的首选试剂。PFI PrimeTM AQ是一种1mg /mL, ph调整和消毒过滤的溶液,含有纯PEI PrimeTM。
聚乙烯亚胺是目前研究最广泛的阳离子聚合物非病毒基因载体,它是由单体(-CH,CH,-NH-)构成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基团的水溶性聚合物。PEI单体中每3个原子含1个氮,并构成同的胺基。这些胺基的pKa值不同,使 PEI在较宽的pH范围均可以被质子化,这是PEI有较强的结合DNA和黏附细胞并作为基因转导载体的重要原因。
分子量是决定其转染效率重要因素,高分子量的PEI具有高效的基因转染效率,但因为其大量正电荷的存在以及非生物降解性,可以导致细胞膜去稳定化,显示出较大的细胞毒性,低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,但基因转染效率也随之降低。在HeLa、COS7、293T和CHO四种细胞上评价交联PEI作为基因载体体外转染pGL3的效率。发现二硫键含量和PEI分子量大小决定了转染效率
阳离子脂质体易穿透细胞膜,转染效率要明显高于其他转染试剂,因而也广泛用于瞬时转染,但因其化学合成不易,商业化常用的脂质体如 Lipofectamine 价格较高,远贵于其他化学转染试剂,因此只适合于小量瞬时转染。
目前最常用的脂质体转染体系是将阳离子脂质体与 DNA 溶液混合,以形成 DNA 夹在脂质双分子层之间的结构。HEK293 细胞是非常适合进行瞬时转染的细胞,很容易接收外来 DNA,在合适的转染条件下,脂质体转染效率可达 80% 以上, 使用商品化罗氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的Lipofectamine2000 的转染效率甚至可达90% 以上。但是传统的 CHO 细胞的转染效率相对较低,只有 40% ~ 60%。
Thermo Fisher 公司新开发的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬时转染系统的转染效率和表达量有了较大的提升,但是商品化的转染试剂盒培养基价格较贵,不太适用于产业化放大。
不同分子量的PEI转染效率不同
枝状的 800 kD PEI 是*报道的可用于多种细胞转染的试剂,枝状的 25 kD PEI(25B)用于HEK293 细胞大规模瞬时转染,其转染效率较枝状2 kD、600 kD、800 kD 或线状 22 kD PEI(22L)的高。
有研究报道,比较了 3 种商品化的 PEI 转染试剂 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max、PEI pro,转染 HEK293 和 CHO 细胞,PEI pro 的转染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max,PEI pro 的毒性*。经过优化,PEI-Max 的表达量优于 25 kD LPEI。
PEI 介导的瞬时转染中 DNA 和 PEI 比例一般为1:2 ~ 1:3(W/W),提高转染试剂比例会提高转染效率,但是随之细胞毒性也会增加。另外转染时的细胞密度、DNA-PEI聚合物的大小、培养基的组成等都会影响转染效果。
产品名称:SEROCHEM Prime-AQ100-5ML PEI Prime™ 转染试剂 产品货号:Prime-AQ100-5ML
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