DNA Extraction Kit
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产品货号:200600
产品介绍:
RecoverEase DNA 分离试剂盒在不使用有毒有机溶剂提取或乙醇沉淀的情况下,从多种全组织(肝、脾、肾、脑、睾丸)中快速分离并回收高分子量(100 至 500 kb)基因组 DNA。
回收的基因组 DNA 完全水合,即可用于多种实验应用,包括 Southern 印迹分析、聚合酶链式反应 (PCR)、脉冲场电泳分析,以及从转基因动物中回收 Lambda 穿梭载体。
仅限研究使用。不可用于诊断目的。
特性
· 从整个组织中分离出高分子量基因组 DNA
· 转基因突变分析中 DNA 分离的理想选择
· 无需有机溶剂提取或乙醇沉淀
· 回收的 DNA 在*天即可使用
· 从 Big Blue 小鼠和其他转基因小鼠中有效回收转基因穿梭载体
· 快速可靠地从全血和各种来源中分离高分子量基因组 DNA
· 从 1 μL 至 5 mL 全血样本中获得可进行 PCR 的基因组 DNA
· 用盐析步骤分离蛋白质,然后用乙醇沉淀 DNA,在所选缓冲液中重新悬浮
工作原理
快速分离高分子量基因组 DNA
RecoverEase DNA 分离试剂盒可在不使用有机溶剂提取或乙醇沉淀的情况下,从多种组织中快速分离高分子量基因组 DNA。该过程涉及组织的物理分解、粗过滤和通过短时离心分离细胞核。然后与含有蛋白酶 K 的高活性蛋白酶溶液一起温育以对细胞蛋白质进行预酶解。

当 DNA 制备物转移到方便、自由浮动的透析杯中时,酶解继续进行,可利用所述透析杯将酶解肽通过半透膜过夜透析。透析后,从透析杯中收集完全水合的纯化高分子量 DNA。得到的 DNA 长度测定结果均为 100 至 500 kb,可立即用于实验应用,包括 Southern 印迹分析、PCR、脉冲场电泳分析或从转基因动物回收 λ 穿梭载体。
RecoverEase 方法与苯酚-氯仿 DNA 分离方法
RecoverEase 方法仅需 17 小时。该 DNA 分离试剂盒的优点在于可以在早期去除细胞胞质中的核酸酶,消除有毒的有机溶剂(例如苯酚和氯仿),以及减少 DNA 提取和过量处理相关的剪切力。DNA 完全水合,可在透析后立即使用。膀胱和皮肤等某些组织不适合进行均质化或细胞核分离,因此不推荐将它们作为用该分离试剂盒进行基因组 DNA 分离的起始材料。
DNA提取试剂盒全血
步骤 过程 时间
1-3 洗涤浓缩细胞 25分钟
4-7 裂解细胞 75分钟
8-10 从蛋白质中提取核酸 30分钟
11-16 纯化DNA 30分钟
整个组织
步骤过程时间
1-2 组织均一化 10分钟
3-5 裂解细胞 2小时
6-9 从蛋白质中提取核酸 30分钟
10-12 纯化DNA 30分钟
培养细胞
步骤 过程 所需时间
1 -3 浓缩细胞 30分钟
4-5 洗涤细胞 30分钟
6-9 裂 解细胞 1.5小时
10-13 从蛋白质中提取核酸 30分钟
14-16 纯化DNA 30分钟
产品货号:200600
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200600
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