EnzyFluo™ AMPK Phosphorylation Assay Kit
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品名:EnzyFluo™AMPK磷酸化测定试剂盒
货号: EAMPK-100
品牌:Bioassay Systems
规格:100次测试/kit
应用:
用于定量荧光免疫酶法测定培养细胞中AMPK的磷酸化状态。
主要特征
敏感的。只需500个细胞/孔即可测量pAMPK调制。
简便。无需细胞裂解,细胞可以培养数天。
方法
FL360 / 450nm,530 / 585nm
样品
细胞
物种
人,小鼠,大鼠
尺寸
100次测试
保质期
6个月
更多细节
5-AMP活化蛋白激酶(AMPK)是细胞内能量平衡的关键传感器。AMPK响应于AMP / ATP比率的增加而被激活,这可能是由许多因素引起的,例如肌肉收缩,饥饿或缺氧。AMPK是异源三聚体蛋白复合物,包含α-(63 kDa),β-(38 kDa)和γ-(38 kDa)亚基。对于每个亚基,已鉴定出同种型(α1,α2,β-1,β-2,γ1,γ2,γ3),这些同型异构体理论上允许形成12种不同的蛋白质。α亚基含有Ser/Thr激酶结构域,而调节亚基含有AMP和ATP以及糖原的结合位点。AMPK在催化域内通过Thr-172上的磷酸化被激活。与基础水平相比,AMP结合导致AMPK活性提高2至5倍。
BioAssay Systems基于细胞的ELISA可测量全细胞中磷酸化的AMPK,并将信号归一化至总蛋白质含量。该抗体可识别两个α亚基,因此可用于所有组织(人,小鼠,大鼠)的细胞。这种简单而有效的测定方法消除了细胞裂解液制备的需要,可用于短期和长期测定中的AMPK调控研究。在该测定中,将在96孔板中生长的细胞固定并在孔中通透。使用荧光ELISA测量AMPK磷酸化(pAMPK),然后在每个孔中测量总蛋白。
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