品名：EnzyFluo™AMPK磷酸化测定试剂盒
货号： EAMPK-100
品牌：Bioassay Systems
规格：100次测试/kit

应用：
用于定量荧光免疫酶法测定培养细胞中AMPK的磷酸化状态。

主要特征
敏感的。只需500个细胞/孔即可测量pAMPK调制。
简便。无需细胞裂解，细胞可以培养数天。

方法
FL360 / 450nm，530 / 585nm

样品
细胞

物种
人，小鼠，大鼠

尺寸
100次测试

保质期
6个月

更多细节
5-AMP活化蛋白激酶（AMPK）是细胞内能量平衡的关键传感器。AMPK响应于AMP / ATP比率的增加而被激活，这可能是由许多因素引起的，例如肌肉收缩，饥饿或缺氧。AMPK是异源三聚体蛋白复合物，包含α-（63 kDa），β-（38 kDa）和γ-（38 kDa）亚基。对于每个亚基，已鉴定出同种型（α1，α2，β-1，β-2，γ1，γ2，γ3），这些同型异构体理论上允许形成12种不同的蛋白质。α亚基含有Ser/Thr激酶结构域，而调节亚基含有AMP和ATP以及糖原的结合位点。AMPK在催化域内通过Thr-172上的磷酸化被激活。与基础水平相比，AMP结合导致AMPK活性提高2至5倍。
BioAssay Systems基于细胞的ELISA可测量全细胞中磷酸化的AMPK，并将信号归一化至总蛋白质含量。该抗体可识别两个α亚基，因此可用于所有组织（人，小鼠，大鼠）的细胞。这种简单而有效的测定方法消除了细胞裂解液制备的需要，可用于短期和长期测定中的AMPK调控研究。在该测定中，将在96孔板中生长的细胞固定并在孔中通透。使用荧光ELISA测量AMPK磷酸化（pAMPK），然后在每个孔中测量总蛋白。