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产品编号:HY-000286

Cygnus F550 CHO HCP ELISA Kit CHO宿主细胞蛋白免疫检测试剂盒,第三代

CHO HCP ELISA kit, 3G

  • 注册品牌: Cygnus Technologies
  • 生产厂家: Cygnus
  • 订购货号: F550
  • 保存温度: 2~8℃
  • 规格型号: 96T/盒
  • 产品编号: HY-000286
  • 产品种类: ELISA检测试剂盒

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产品英文名称:CHO HCP ELISA kit, 3G
产品中文名称:CHO HCP酶联免疫分析试剂盒

 

CHO HCP ELISA 试剂盒 产品介绍:
CHO HCP是第三代ELISA试剂盒,比之前试剂盒具有更广泛HCP反应性。新型试剂盒在检测CHO HCPs 蛋白方面有很多改进。新试剂盒具有更高的灵敏度,在抗体物和其它CHO表达蛋白中检测HCP蛋白可以精确到到十亿分之一百。第三代ELISA试剂盒经过大量药物原料和中试样品检测评估,是工艺开发和大量释放试验检测的通用方法。抗体反应性使用传统2D 蛋白杂交技术(2D HPLC-ELISA)鉴定。2D HPLC-ELISA方法显示抗体对超过750种HCPs都具有反应性。用蛋白检测方法和ELISA正交试验表明这些多达750种的宿主细胞蛋白意味着高于98%的蛋白种类均可用ELISA方法检测到。因此,这种抗体可以避免丢失任何重要的HCP蛋白。

产品使用时一定要做好保护措施:0.5M硫磺酸有强腐蚀性,要避免接触眼睛、皮肤和衣物。检测前所有试剂都要平衡到室温。

 

§检测原理:CHO检测是一个双位点酶联免疫检测。样本中包含的CHO HCPs蛋白与标记有抗-CHO抗体的辣根过氧化物酶同时反应,反应发生在之前涂有一层吸附性抗-CHO蛋白抗体的微量滴定板中进行。免疫反应构成为夹层式结构:固相抗休-HCP-酶标记抗体。反应结束后清洗微量滴定板去除未结合反应物。添加TMB作用底物反应。微量滴定板读数器上测定水解物浓度,水解物浓度与CHO HCPs蛋白浓度成比例。用提供的标准液绘制标准曲线,根据读数可以计算出CHO HCPs蛋白含量。

 

§检测过程:取出所有试剂平衡到室温→移取100µl anti-CHO:HRP(#F551)至每孔→分别移取50µl标准液,对照物和样品至待测孔→密封滴定板,摇床室温温育2小时,180rpm→清空小孔,用纸吸干残留液,350µl清洗缓冲液清洗4次→加100µl TMB 作用物(#F005)→室温静置30分钟,不需摇床→加100µl反应终止液(#F006)→分光光度计450/650nm读数

 

§结果分析:标准液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作标准曲线,标准液浓度相当于免疫反应HCP总浓度。根据测定的小孔中标准液吸光值绘制标准曲线。数据分析可以使用计算机选配曲线,例如点到点,三次样本函数,或四参数逻辑曲线。不要使用线性回归分析修改样品吸光值,这样会出现显著误差。也可以手工绘图,Y轴标注吸光值,X轴标注浓度。然后根据样品吸光值计算出样品中HCP浓度。(操作时每一浓度标准液都要重复滴定到两个小孔中,以便计算平均分光光度值,样品也需计算平均吸光值)。

 

CHO HCP ELISA组成成份:
● Anti-CHO:HRP(辣根过氧化物酶)            1x12mL   F551(Product#)
● Anti-CHO微量滴定板                             12×8孔   F552
● CHO HCP标准液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)    1mL/瓶  F553
● Stop Solution终止液(0.5M硫磺酸)           1x12mL  F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基联苯氨)                       1x12mL  F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍浓缩)             1x50mL   F004

 

需自备物:
» 微量板分光光度计,双波长450 & 650nm
» 移液器-50L and 100L
» 可重复使用或多通道移液器-100L
» 微量板摇床(150 – 200 rpm)
» 样品稀释液(推荐使用Cat # I028)
» 1L清洗瓶
» 蒸馏水

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